1.小米蛋白水解物在制备预防或治疗胃溃疡的药物中的应用；
所述小米蛋白水解物的水解度为15.6％-31.4％，所述的小米蛋白水解物的制备方法主要包括以下步骤：
(1)粉碎小米，将所得小米粉与有机溶剂混合，萃取后离心，将收集的残渣风干，得到脱脂小米粉；
(2)取步骤(1)得到的脱脂小米粉与超纯水混合均匀，加入α-淀粉酶酶解，灭酶，离心去除上清，将收集的固体沉淀冷冻干燥，得到的提取物；
(3)取步骤(2)得到的提取物与超纯水混合均匀，pH调至1-4，按酶/底物
＝1:25-1:100加入胃蛋白酶，酶解0.5-4h，灭酶；
(4)pH调至6-9，按酶/底物＝1:5-1:20加入胰蛋白酶，酶解0.5-4h，灭酶；
(5)离心步骤(4)得到的水解样品，收集上清液，冷冻干燥，获得小米蛋白水解物。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤(3)中提取物与超纯水的料液比为1:20-1:100(w/v)。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤(3)和步骤(4)中酶解温度为30-40℃。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤(5)中离心条件为4000-1000g离心5-30min。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂和口服液体制剂。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的片剂包括糖衣片、口腔崩解片、泡腾片、咀嚼片和缓释片。
7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物中包含有药品中可接受的辅料。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的辅料包括填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂和矫味剂。

技术领域
[0001]本发明属于医药技术领域，尤其是小米蛋白水解物在制备预防或治疗胃溃疡的药物中的应用。
背景技术
[0002]胃溃疡是消化系统的常见病和多发病，病理表现为胃黏膜的损伤、糜烂、溃疡、出血等，患者可出现胃脘部胀痛、隐痛、烧心、恶心呕吐、嗳气、反酸等症状，病情长期发展可诱发消化道出血、胃穿孔等严重并发症，给患者的健康带来明显影响。很多学者对胃溃疡的发病机制进行了相关研究。研究主要集中在几种学说上：胃酸溃疡学说、消化酶学说、炎症失衡学说、幽门杆菌感染学说等。由于胃溃疡患者常伴有胃黏膜的慢性破坏和缺损，导致胃黏膜屏障功能减退，加之反复的胃酸和消化液分泌，使之发生恶性混合，溃疡经久不愈，并易转发为胃癌。目前胃溃疡主要以药物治疗为主，主要包括质子泵抑制剂、H2受体拮抗剂、抗菌药、胃黏膜保护药物等，其中大多采用质子泵抑制剂加两种抗菌素的三联方案，也有三联方案加铋剂等胃黏膜保护剂的治疗方案。而现存的大多数药物或有一定的不良反应，或单独使用效果不明显需搭配其他药物联合治疗，或存在复发率高的弊端。研究开发一种常见的、易摄取的、大众接受度高的，可用于防范、缓解甚至是治疗胃溃疡的药物无疑将在一定程度上减轻胃溃疡给大众带来的困扰，将胃溃疡的防治真正落入生活，同时，也可能会为胃溃疡的预防、治疗及预后提供一个新的思路。
[0003]小米，禾本科植物，它耐干旱耐盐碱，生命力顽强，主要分布于干旱地区和半干旱地区，是中国的传统农作物之一。研究表明，小米中蛋白质的含量为12.3％，并且氨基酸种类齐全，比例均衡，可以作为优质的植物蛋白来源，同时，小米蛋白还具有低致敏、易消化的特性。小米蛋白质中含有10.20％的芳香氨基酸、19.89％的支链氨基酸和10.15％的脯氨酸。这表明小米蛋白可能具有独特的理化性质和生理功能。小米蛋白中必需氨基酸约占总氨基酸含量44.7％，且各项氨基酸含量均高于FAO/WHO的推荐值，达到了全价蛋白的标准。然而，将小米蛋白水解物用于制备预防或治疗胃溃疡的药物的相关研究还未见报道。
发明内容
[0004]鉴于此，本发明的目的是提供小米蛋白水解物在制备预防或治疗胃溃疡的药物中的应用。
[0005]本发明目的是通过以下方式实现：
[0006]本发明提供小米蛋白水解物在制备预防或治疗胃溃疡的药物中的应用。
[0007]进一步的，所述胃溃疡包括乙醇诱导胃溃疡和幽门结扎诱导胃溃疡。
[0008]进一步的，所述的小米蛋白水解物的制备方法主要包括以下步骤：
[0009](1)粉碎小米，将所得小米粉与有机溶剂混合，萃取后离心，将收集的残渣风干，得到脱脂小米粉；
[0010](2)取步骤(1)得到的脱脂小米粉与超纯水混合均匀，加入α-淀粉酶酶解，灭酶，离心去除上清，将收集的固体沉淀冷冻干燥，得到的提取物；
[0011](3)取步骤(2)得到的提取物与超纯水混合均匀，pH调至1-4，按酶/底物
[0012]＝1:25-1:100加入胃蛋白酶，酶解0.5-4h，灭酶；
[0013](4)pH调至6-9，按酶/底物＝1:5-1:20加入胰蛋白酶，酶解0.5-4h，灭酶；
[0014](5)离心步骤(4)得到的水解样品，收集上清液，冷冻干燥，获得小米蛋白水解物。
[0015]进一步的，步骤(1)的具体过程为粉碎小米，将所得小米粉与正己烷按料液比1:8-1:12(w/v)混合，超声萃取20min-2h，500-8000g离心，弃上清，并对所得的残渣重复上述操作一次，将收集的残渣风干，得到脱脂小米粉。
[0016]进一步的，步骤(2)的具体过程为取步骤(1)得到的脱脂小米粉与超纯水按料液比1:4-1:8(w/v)混合均匀，pH调至6-8，加入10-50U/g的α-淀粉酶，30-60℃下酶解0.5-4h，灭酶，冷却至室温，500-8000g离心去除上清，用纯净水冲洗并重复离心2-4次，将收集的固体沉淀冷冻干燥，得到的提取物。
[0017]进一步的，步骤(3)中提取物与超纯水的料液比为1:20-1:100(w/v)。
[0018]进一步的，步骤(3)和步骤(4)中酶解温度为30-40℃。
[0019]进一步的，步骤(5)中离心条件为4000-1000g离心5-30min。
[0020]进一步地，所述小米蛋白水解物的水解度为15.6％-31.4％。
[0021]进一步地，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂和口服液体制剂。
[0022]进一步地，所述的片剂包括糖衣片、口腔崩解片、泡腾片、咀嚼片和缓释片。
[0023]进一步地，所述的药物中包含有药品中可接受的辅料。
[0024]进一步地，所述的辅料包括填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂和矫味剂。
[0025]本发明相对于现有技术具有的有益效果如下：
[0026]小米为药食同源谷物食品，提取的小米蛋白水解物用于制备预防或治疗胃溃疡症和胃黏膜屏障功能受损的药物，可有效抑制胃酸及促炎因子表达，增强抗氧化剂及抗炎因子表达，效果显著，且没有毒性，长期服用没有副作用。
附图说明
[0027]为了更清楚地说明本发明实施例，下面将对实施例涉及的附图进行简单地介绍。
[0028]图1为小米蛋白水解物对乙醇诱导小鼠胃溃疡症状的影响，A：胃组织病变部分图片，B：胃溃疡部位的石蜡组织切片，其中a为黏膜上皮缺损，b为炎性溢出，c为腺结构紊乱，d为黏膜下层水肿，C：胃溃疡损伤指数，D：胃溃疡抑制率；
[0029]图2为小米蛋白水解物对幽门结扎诱导胃溃疡小鼠的胃内容物的pH(A)、胃内容物体积(B)、总酸量(C)、胃酸分泌(D)、胃黏液分泌(E)、胃蛋白酶活性(F)的影响；
[0030]图3为小米蛋白水解物对幽门结扎诱导胃溃疡小鼠的胃内容物中CAT(A)、GSH-PX(B)、SOD(C)和MDA(D)的含量的影响；
[0031]图4为小米蛋白水解物对幽门结扎诱导胃溃疡小鼠的胃内容物中抗炎因子NO(A)和PGE-2(B)含量的影响；
[0032]图5为小米蛋白水解物对幽门结扎诱导胃溃疡小鼠的胃内容物中促炎因子IL-1β(A)、IL-6(B)、TNF-α(C)、MPO(D)含量的影响；
[0033]图6为小米蛋白水解物对幽门结扎诱导胃溃疡小鼠的十二指肠内容物中α淀粉酶(A)、葡萄糖苷酶(B)、糜蛋白酶(C)、胰蛋白酶(D)活性的影响。
具体实施方式
[0034]下面结合实施例对本发明进行详细的说明，但本发明的实施方式不限于此，显而易见地，下面描述中的实施例仅是本发明的部分实施例，对于本领域技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，获得其他的类似的实施例均落入本发明的保护范围。
[0035]实施例1
[0036]1.小米蛋白的制备
[0037]小米蛋白的制备方法主要包括以下步骤：
[0038](1)使用超微粉碎机研磨小米，将所得小米粉过60目筛，称取100g小米粉与正己烷按料液比1:10(w/v)混合，超声萃取1h，2000g离心，弃上清，并对剩下的残渣重复上述操作一次，将收集的残渣放置于通风橱中自然风干，得到脱脂小米粉。
[0039](2)称取(1)所述方法得到的脱脂小米粉与超纯水按料液比1:6(w/v)混合并充分搅拌，用1mol/L NaOH调至pH＝7.0，加入30U/g的α-淀粉酶，50℃水浴酶解2h，期间持续搅拌使体系均匀；反应结束后沸水浴20min灭酶，自然冷却至室温，2000g离心去除上清，用纯净水冲洗并重复离心2-4次，将收集的固体沉淀冷冻干燥，得到的提取物。
[0040]2.蛋白纯度的测定
[0041]本发明采用福林酚法测定提取物的蛋白纯度。甲液：A液：分别配制4％的Na2CO3溶液和0.2mol/L的NaOH溶液，使用前1:1混合；B液：分别配制1％的CuSO4·5H2O溶液和2％的酒石酸钾钠溶液，使用前1:1混合。将A液和B液按50:1混合得到甲液。乙液：福林酚试剂。
[0042]向200μL甲液中加入40μL提取物溶液(提前稀释至适宜浓度)，混匀后在30℃条件下反应10min，再加入20μL乙液，混匀后在30℃条件下反应30min，以牛血清白蛋白(BSA)为标准品，测定500nm吸光度。通过福林酚法测得提取物的蛋白含量为81.8％-94.6％，表明提取物为富含小米蛋白的提取物。
[0043]实施例2
[0044]1.小米蛋白水解物的制备
[0045]小米蛋白水解物的制备方法主要包括以下步骤：
[0046](1)称取实施例1制备的小米蛋白与超纯水按料液比1:50(w/v)混合，
[0047](2)用1mol/L HCl将调至pH＝2.0；
[0048](3)按酶/底物＝1:70加入胃蛋白酶(500U/mg)；
[0049](4)37℃水浴酶解2h；
[0050](5)沸水浴20min灭酶活，自然冷却至室温；
[0051](6)用1mol/L NaOH调至pH＝7.5，按酶/底物＝1:10加入胰蛋白酶(4×USP)；
[0052](7)37℃水浴酶解2h；
[0053](8)沸水浴20min使酶失活，自然冷却至室温；
[0054](9)所得的水解样品于8000g离心20min，收集上清液；
[0055](10)冷冻干燥，获得小米蛋白水解物，即小米蛋白水解物粉末(FMPH)。
[0056]2.多肽纯度的测定
[0057]本研究采用福林酚法测定小米蛋白水解物中多肽的纯度。
[0058]甲液：A液：分别配制4％的Na2CO3溶液和0.2mol/L的NaOH溶液，使用前1:1混合；B液：分别配制1％的CuSO4·5H2O溶液和2％的酒石酸钾钠溶液，使用前1:1混合。将A液和B液按50:1混合得到甲液。
[0059]乙液：福林酚试剂。
[0060]标准曲线的建立：配制浓度梯度为0，50，100，150，200，250，300μg/mL的BSA标准溶液，向200μL甲液中加入40μL样品溶液，混匀后在30℃条件下反应10min，再加入20μL乙液，混匀后在30℃条件下反应30min，在500nm处测定吸光度。每个浓度设置三个平行，以BSA浓度为纵轴，吸光度为横轴做标准曲线。
[0061]小米蛋白水解物中多肽纯度的测定：向200μL甲液中加入40μL小米蛋白水解物样品溶液(提前稀释至适宜浓度)，混匀后在30℃条件下反应10min，再加入20μL乙液，混匀后在30℃条件下反应30min，在500nm处测定吸光度。每个样品设置三个平行，将样品的吸光度代入到BSA标准曲线中计算小米蛋白水解物中多肽纯度。
[0062]3.小米蛋白水解物水解度的测定
[0063]水解度(DH)是指是被水解的肽键数的百分比，本发明采用邻苯二甲醛(OPA)法测定小米蛋白的水解度。
[0064]OPA试剂：A液：将1.905g四硼酸钠和50mg十二烷基硫酸钠(SDS)溶解于40mLMilli-Q水中，超声处理1h。B液：将40mg邻苯二甲醛(OPA)溶解于1mL无水乙醇中，待完全溶解后全部转移至A液中。再向A液中加入44mg二硫苏糖醇(DTT)，最终用Milli-Q水定容至50mL。
[0065]丝氨酸标准溶液：称取10mg丝氨酸溶解于Milli-Q水中，配制为0.9516mM丝氨酸标准溶液。
[0066]向96孔板中分别加入32μLMilli-Q水，丝氨酸标准溶液和样品溶液，再加入240μLOPA溶液，混匀后于37℃条件下避光反应2min，在340nm处测定吸光度，每个样设置三个平行。
[0067]水解度(DH)的计算
[0068]
[0069]htot取决于原料的类型。对于大多数食物蛋白而言，氨基酸的平均分子量是125g/mol，则htot约为8，也即每g蛋白约含有8mmol的肽键。
[0070]h是丝氨酸氨基毫摩数的函数。
[0071]
[0072]
[0073]其中0.9516为标准样品丝氨酸的浓度，即0.9516mmol/L，C为样品的蛋白质量浓度(mg/mL)。
[0074]通过福林酚法测得小米蛋白水解物的蛋白纯度为83.8％±5.95％。通过OPA法测得小米蛋白的水解度为31.4％±1.44％。
[0075]实施例3小米蛋白水解物对胃溃疡小鼠溃疡症状的改善
[0076]80只22g SPF级雄性ICR小鼠，购自维通利华(北京)实验动物科技有限公司，小鼠饲养于南开大学动物饲养中心，并维持标准实验室条件下饲养：25℃±2℃，相对湿度50±5％，12小时循环光照，自由取水取食，相关实验操作符合动物实验伦理学要求，普通饲料喂养1周适应环境，实验从第二周正式开始。
[0077]1.小米蛋白水解物对乙醇诱导胃溃疡的作用
[0078]本实验采用国家食品药品监督管理总局(CFDA 2012年第107号修订)推荐的无水乙醇诱导小鼠胃溃疡模型，评估低剂量(100mg/kg)和高剂量(400mg/kg)小米蛋白水解物对胃黏膜的保护作用。适应期结束后，将小鼠随机分为对照组(NM)，模型组(MD)，低剂量组(LPH)，高剂量组(HPH)四组，每组10只。每天给LPH、HPH组小鼠分别灌胃100、400mg/kg小米蛋白水解溶液，对照组和模型组的小鼠则灌胃等体积生理盐水，持续灌胃14天；在最后一次灌胃小米蛋白水解物前24小时小鼠禁食不禁水，并在最后一次灌胃后1h，对照组用生理盐水灌胃，其余组用无水乙醇10mL/kg灌胃造胃溃疡模型，于1小时后处死解剖，模型建立成功的标准为肉眼可见的胃黏膜出血和线型血斑。
[0079]利用乙醇诱导胃溃疡小鼠胃组织进行胃溃疡抑制率的评估及病理分析：将取出的小鼠胃部沿着胃大弯剪开，用预冷生理盐水冲洗，放置在白色蜡版上，用相机拍摄胃组织病变部分，用游标卡尺测量溃疡条纹的长度与宽度，根据出血粘膜病变面积按公式(1)评估溃疡损伤指数，并根据公式(2)计算溃疡抑制率。
[0080]公式(1)：溃疡损伤指数(UI)＝1A+2B+3C；其中，A为≤1mm的小溃疡个数，B为>1mm且≤3mm的溃疡个数，C为>3mm的线性溃疡个数。
[0081]公式(2)：抑制率(％)＝[(UI1-UI2)×100％]/UI1；其中,UI1为乙醇组溃疡指数，UI2为小米蛋白组溃疡指数。
[0082]采用苏木精-伊红染色法对胃黏膜的一般微观结构进行组织病理学观察：选取胃溃疡最严重的部位制作石蜡组织切片(4μm)，经常规脱蜡至水后，用苏木精-伊红染色法染色，随后用光学显微镜对胃黏膜的HE染色切片进行镜下观察。
[0083]如图1A所示，NM组胃组织形态结构正常，镜下可见粘膜层、腺体层、粘膜下层均保存完好，肌肉结构正常(如图1B)。MD组小鼠的胃粘膜损伤严重，有明显的出血和线性血斑，镜下可见胃粘膜上皮大面积缺损，腺体层结构紊乱严重，黏膜下层可见明显水肿(如图1B)。较MD组，LFPH组病变程度有所减轻但仍可见粘膜出血，镜下见上皮组织明显缺损，腺结构部分紊乱(如图1B)。较MD组，HFPH组对胃溃疡病变抑制程度明显，粘膜病变不明显，镜下仅可见胃黏膜上皮轻微缺损及腺结构小面积紊乱(如图1B)。由上述结果及计算所得的ULI(图1C)可知，小米蛋白水解物可以有效改善乙醇诱导胃溃疡小鼠的溃疡状况。
[0084]2.小米蛋白水解物对幽门结扎诱导胃溃疡的作用
[0085]采用Kamarolzaman et al.所描述的模型(稍作修改)评估低剂量(100mg/kg)和高剂量(400mg/kg)小米蛋白水解物对胃黏膜的保护作用。适应期结束后，将小鼠随机分为对照组，模型组，低剂量组(LPH)，高剂量组(HPH)四组，每组10只。每天给LPH、HPH组小鼠分别灌胃100、400mg/kg小米蛋白水解溶液，对照组和模型组的小鼠则灌胃等体积生理盐水，持续灌胃14天；在最后一次灌胃小米蛋白水解物前24小时小鼠禁食不禁水，最后一次灌胃后，在麻醉状态下，剪去上腹部毛，常规消毒皮肤，腹腔内注射戊巴比妥钠盐溶液(12mg/mL,2.0mL)，在不破坏血供的情况下，切开2～3cm的水孔用于结扎幽门。除NC组外，其余各组均进行幽门结扎；将每只小鼠的腹部缝合，在笼中休养5h，颈椎脱位法进行处死，采集胃内容物及十二指肠内容物于刻度离心管中。
[0086](1)小米蛋白水解物对幽门结扎诱导小鼠胃溃疡胃黏膜屏障相关指标的影响
[0087]胃酸是胃液的主要成分之一，多由胃壁细胞分泌，胃酸分泌过多会出现反酸、烧心、胃部灼烧感等症状，可进一步引起慢性胃炎、消化性溃疡等器质性病变。胃蛋白酶是在胃酸的作用下由胃蛋白酶原转化而来的，胃蛋白酶活性升高说明胃酸分泌过多，会对胃黏膜保护屏障造成损伤，易引起慢性萎缩性胃炎、胃溃疡等疾病。同样的，胃粘液中含有黏液蛋白、碳酸氢盐等成分，可附着在粘液上皮表面，隔离胃酸；另外，粘液含有碱性成分，可以中和胃酸，二者共同发挥保护胃黏膜的作用。因此本实施例检测了幽门结扎诱导胃溃疡小鼠的胃内容物的pH、胃内容物体积、总酸度、总酸排出量、胃泌素、胃分泌液、胃蛋白酶活性。其中，pH由FE-28pH计测得，总酸度通过滴定法获得，由公式得出总酸排出量。按照试剂盒说明书步骤测定胃泌素含量和胃蛋白酶活性。
[0088]检测结果如图2所示，与MD组相比，LFPH组和HFPH组均可使胃酸分泌减少(图2A-D)，胃黏液分泌增加(图2E)且抑制胃蛋白酶活性(图2F)，HFPH组作用最为显著。以上结果说明，小米蛋白水解物可有效缓解幽门结扎诱导胃溃疡小鼠胃黏膜屏障的损伤。
[0089](2)小米蛋白水解物对胃溃疡小鼠抗氧化剂活性的影响
[0090]CAT、GSH-PX、SOD为胃组织中的常见抗氧化剂，可分别在逆境中清除过量活性氧、催化GSH变为GSSG、使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物、作为催化剂作用于超氧阴离子自由基的转移歧化反应，为改善胃上皮的抗损伤能力、维持上皮结构和功能的完整及缓解炎症的主要方式。而MDA则是衡量氧化胁迫程度的常用指标之一，是自由基作用于脂质发生过氧化反应的氧化终产物，具有细胞毒性且可加剧膜损伤。因此本实施例按照抗氧化酶活性测定试剂盒(南京建成)说明书步骤检测了采集的胃内容物的CAT、GSH-PX、SOD和MDA的含量。
[0091]检测结果如图3A-D所示，与MD组相比，LFPH组和HFPH组均可提高CAT、GSH-PX、SOD的活性且HFPH组的作用最为显著。虽然可以看到MD组、LFPH组、HFPH组中MDA较NM组有所升高，但并不能说明小米蛋白水解物明显抑制胃溃疡造成的MDA升高。以上结果说明，小米蛋白水解物可通过提高胃溃疡小鼠胃组织中抗氧化剂活性的途径改善胃黏膜损伤。
[0092](3)小米蛋白水解物对胃溃疡小鼠抗炎因子含量的影响
[0093]PGE-2可以抑制胃酸分泌，同时具有免疫抑制和抗炎作用；NO在调节胃肠分泌和胃肠运动中具有重要作用，且是一种免疫调节因子，在炎症反应中发挥关键功能。因此本实施例按照生化试剂盒(南京建成)说明书步骤检测了采集的胃内容物的PGE-2、NO的含量。
[0094]检测结果如图4A-B所示，与MD组相比，LFPH组和HFPH组均可提高PGE-2、NO的含量且HFPH组的作用最为显著。以上结果说明，小米蛋白水解物可通过提高胃溃疡小鼠胃组织中抗炎因子含量的途径直接抑制胃溃疡炎症的发展。
[0095](4)小米蛋白水解物对胃溃疡小鼠促炎因子含量的影响
[0096]TNF-α、IL-1β、IL-6、MPO均为主要促炎症因子，在炎症反应中起重要作用，能够快速激活中性粒细胞、淋巴细胞等免疫细胞参与炎症反应。因此本实施例按ELISA试剂盒(南京建成)说明书步骤检测了采集的胃内容物的TNF-α、IL-1β、IL-6、MPO的含量。
[0097]检测结果如图5A-D所示，与MD组相比，LFPH组和HFPH组均可抑制TNF-α、IL-1β、IL-6含量且可显著抑制MPO的含量，而HFPH组对TNF-α、IL-1β、IL-6的抑制作用更为显著。以上结果说明，小米蛋白水解物可通过抑制胃溃疡小鼠胃组织中促炎因子含量的途径直接抑制胃溃疡炎症的发展。
[0098](5)小米蛋白水解物对幽门结扎诱导胃溃疡小鼠的十二指肠内容物中α淀粉酶，葡萄糖苷酶、胰蛋白酶及糜蛋白酶活性的影响
[0099]葡萄糖苷酶是生物体内糖代谢途径中的重要成员之一，参与淀粉及糖原的代谢途径。胰蛋白酶为胰腺分泌的一种蛋白水解酶，作为消化酶而起作用，能迅速分解变性蛋白质，糜蛋白酶作用途与胰蛋白酶相似。因此本实施例按照消化酶活性试剂盒(南京建成)说明书步骤检测了采集的十二指肠内容物的胰蛋白酶、α淀粉酶、葡萄糖苷酶、糜蛋白酶活性。
[0100]检测结果如图6A-D所示，与MD组相比，LFPH组和HFPH组对胰蛋白酶活性升高均有抑制作用，LFPH组和HFPH组对α淀粉酶、葡萄糖苷酶、糜蛋白酶活性的抑制并不明显。以上结果说明，小米蛋白水解物对小鼠胃溃疡症状的缓解与其对十二指肠内容物中酶活性的影响关系不大。
[0101]最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。